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      ELISA實驗:酶聯(lián)免疫吸附測定原理

      更新時間:2025-10-30  |  點擊率:315

        ELISA實驗:酶聯(lián)免疫吸附測定原理

        ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的高靈敏度免疫檢測技術(shù),通過酶催化顯色反應(yīng)實現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)的定性或定量分析?。其核心原理如下:

        基本原理?

        固相包被?

        將抗原或抗體固定在聚苯乙烯微孔板等固相載體表面,保持其免疫活性?。

        酶標(biāo)記結(jié)合?

        使用辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記抗體/抗原,形成酶標(biāo)復(fù)合物,既保留免疫活性又具備酶催化能力?。

        顯色反應(yīng)?

        加入底物(如TMB或PNPP)后,酶催化底物生成有色產(chǎn)物,顏色深淺與目標(biāo)物濃度成正比,通過酶標(biāo)儀測定吸光度值定量?。

        Elisa的檢測原理

        ELISA的定義和基本原理

        ELISA的三個核心步驟

        夾心法實驗流程

        ELISA的三種檢測類型

        ELISA的總結(jié)

        技術(shù)特點?

        高靈敏度?:檢測限可達(dá)皮克級(pg/mL)?。

        特異性強(qiáng)?:依賴抗原-抗體結(jié)合,單克隆抗體技術(shù)進(jìn)一步提升了特異性?。

        方法多樣?:包括雙抗體夾心法(大分子)、競爭法(小分子)、間接法(抗體檢測)等?。

        應(yīng)用場景?

        醫(yī)學(xué)診斷?:HIV、HBV等傳染病檢測,腫瘤標(biāo)志物篩查?。

        科研領(lǐng)域?:細(xì)胞因子定量、藥物藥效評價?。

        食品安全?:獸藥殘留、過敏原檢測?。

        關(guān)鍵注意事項?

        加樣精度?:移液器需校準(zhǔn),避免氣泡或孔壁殘留導(dǎo)致誤差?。

        溫度控制?:試劑與樣本需平衡至室溫,減少動力學(xué)差異?。

        洗滌?:手工拍板需垂直操作,機(jī)器洗板需檢查沖洗頭通暢?。

        如需進(jìn)一步了解實驗流程,可參考:ELISA操作視頻演示?。

        注:以上僅供參考,不作為實際數(shù)據(jù),實驗需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。

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