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      人脂聯素(ADP)ELISA試劑盒實驗使用說明書

      發表時間:2025/8/7  |  點擊率:469
       
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        以下是關于人脂聯素(ADP)ELISA試劑盒的實驗使用說明書綜合整理:

        BS-1528人脂聯素(ADP)ELISA試劑盒

        一、實驗原理

        采用雙抗體夾心法檢測樣本中ADP含量。通過抗-ADP抗體包被微孔板捕獲ADP,再與HRP標記的ADP抗體結合形成復合物,經TMB顯色后測定450nm吸光度(OD值),顏色深淺與ADP濃度呈正相關。

        二、試劑盒組成

        組分 規格(96T) 保存條件

        預包被酶標板 1×96孔 2-8℃干燥

        標準品 0.5ml×1瓶(1350μg/L) 2-8℃冷藏

        酶標試劑(HRP標記) 6ml×1瓶 2-8℃避光

        顯色劑A/B液 各6ml×1瓶 2-8℃避光

        20×濃縮洗滌液 50ml×1瓶 2-8℃冷藏

        終止液 6ml×1瓶 常溫保存

        三、樣本處理要求

        血清/血漿‌

        室溫凝固10-20分鐘后離心(2000-3000rpm,20分鐘),避免溶血

        血漿推薦使用EDTA或肝素抗凝

        細胞培養上清‌

        直接離心取上清,或PBS稀釋細胞懸液后凍融裂解

        組織樣本‌

        需用PBS勻漿后離心,分裝保存于-20℃

        注意事項‌

        含NaN3的樣本會HRP活性,需避免使用

        反復凍融不超過3次

        四、操作步驟(以96孔板為例)

        標準品稀釋‌

        將1350μg/L標準品按梯度稀釋(如:1350→675→337.5→168.75→84.38→42.19→21.09→0μg/L)

        加樣孵育‌

        標準品孔/樣本孔各加100μl,37℃孵育120分鐘

        洗滌‌

        用1:20稀釋的洗滌液洗板5次,每次靜置10-20秒

        加酶標試劑‌

        每孔加HRP標記抗體50μl,37℃孵育60分鐘

        顯色與終止‌

        加TMB底物A/B液各50μl,避光反應15分鐘后加終止液50μl

        五、結果計算

        以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線

        檢測范圍通常為21.09-1350μg/L,靈敏度可達0.01μg/ml

        六、注意事項

        試劑使用前需室溫平衡30分鐘,濃縮洗滌液結晶需37℃孵育15分鐘

        顯色時間超過20分鐘可能導致背景過高

        不同批號試劑不可混用

        注,以上資料僅供參考,如需具體品牌說明書,可參考本生、天正信達或分細生物的詳細文檔。

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