大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說明如下： 實(shí)驗(yàn)原理 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))通過特異性抗體捕獲目標(biāo)蛋白(FGFR1)，結(jié)合酶標(biāo)記的二抗和底物顯色反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。FGFR1作為受體酪氨酸激酶家族成員，其檢測(cè)需注意抗體對(duì)跨膜區(qū)或胞外結(jié)構(gòu)域的特異性結(jié)合?。 試劑準(zhǔn)備 標(biāo)準(zhǔn)品配制?：需將FGFR1標(biāo)準(zhǔn)品按梯度稀釋(如2.4-0.15 IU/mL范圍)，建議使用含0.1% BSA的PBS緩沖液以減少非特異性結(jié)合。 抗體選擇?：推薦使用抗大鼠FGFR1單克隆抗體(如Cell Signaling Technology產(chǎn)品)作為捕獲抗體，多克隆抗體作為檢測(cè)抗體。 封閉液?：常用5%脫脂奶粉或3% BSA封閉未結(jié)合位點(diǎn)，室溫孵育1小時(shí)。 操作步驟 樣本處理?：組織樣本(如腎組織)需裂解后離心取上清，BCA法測(cè)定蛋白濃度，建議稀釋至1-10 μg/mL范圍。 包板與孵育?： 抗體包被(4℃過夜)后，37℃孵育樣本1小時(shí); 加入生物素標(biāo)記二抗，37℃孵育30分鐘; 加入HRP標(biāo)記鏈霉親和素，顯色前避光孵育15分鐘。 顯色與終止?：TMB底物顯色3-5分鐘后，用2M硫酸終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀讀取450nm吸光度。 Elisa實(shí)驗(yàn)操作步驟流程： 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備 第一步：配置緩沖液和洗液 第二步：樣本活化 第三步：標(biāo)準(zhǔn)品溶解和稀釋 第四步：包被抗體 第五步：洗滌 第六步：顯色反應(yīng) 第七步：結(jié)果檢測(cè) 數(shù)據(jù)分析 標(biāo)準(zhǔn)曲線?：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，擬合四參數(shù)邏輯曲線(R2需>0.99)。 靈敏度?：?jiǎn)慰寺】贵wELISA檢測(cè)下限可達(dá)0.15 IU/mL，多克隆抗體為18.9 IU/mL。 注意事項(xiàng) 交叉反應(yīng)?：需驗(yàn)證抗體對(duì)大鼠FGFR1的特異性，避免與其他FGFR亞型(如FGFR2)交叉反應(yīng)。 樣本保存?：組織裂解液需分裝后-80℃保存，避免反復(fù)凍融。 注：以上僅供參考，不作為實(shí)際數(shù)據(jù)，實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒 天津天正信達(dá)供應(yīng)：RNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄試劑盒、PCR試劑盒 、提取試劑盒、色譜進(jìn)樣瓶、培養(yǎng)基瓶、試劑瓶、胎牛血清、染色液、試劑瓶、QPCR試劑盒、生物試劑、抗體、瓊脂糖、實(shí)驗(yàn)耗材，我司擁有一支覆蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等專業(yè)人員的研發(fā)、構(gòu)建了儀器設(shè)備齊全的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)，主要包括AKTA、高壓均質(zhì)機(jī)、全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀、高速落地離心機(jī)和qPCR儀等大型儀器設(shè)備。 | 
