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      微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA試劑盒使用說明書?

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        微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA試劑盒使用說明書?

        BS-0029-WA微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA科研試劑盒

        BS-0029-WB微生物乙酰乙酰輔酶A(AA-CoA)ELISA科研試劑盒

        版本:2025.10?

        一、實(shí)驗(yàn)原理?

        本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)微生物樣本中的AA-CoA濃度。預(yù)包被抗AA-CoA抗體的微孔板中依次加入樣本/標(biāo)準(zhǔn)品,與生物素標(biāo)記的二抗形成復(fù)合物,經(jīng)HRP-鏈霉親和素催化TMB顯色,450nm測(cè)定吸光度(OD值),濃度與OD值呈正比?。

        二、試劑組成?

        組分 規(guī)格(48T/96T) 保存條件

        預(yù)包被微孔板 1×8條/12條 2-8℃(避光)

        AA-CoA標(biāo)準(zhǔn)品 1瓶(凍干) -20℃

        生物素標(biāo)記抗體 1瓶(60μL) -20℃(避光)

        HRP-鏈霉親和素 1瓶(60μL) -20℃(避光)

        TMB顯色液 1瓶(11mL) 2-8℃(避光)

        終止液(2M H?SO?) 1瓶(6mL) 室溫

        注:其余緩沖液(洗滌液、封閉液等)詳見試劑盒內(nèi)說明書。

        三、樣本處理?

        微生物培養(yǎng)液?:

        離心(3000g,10min)收集上清,0.22μm濾膜除菌?。

        若濃度過高,用PBS稀釋(建議1:5~1:10)。

        菌體裂解液?:

        超聲破碎(冰浴,功率200W,3s/間隔10s,重復(fù)30次)?。

        離心(8000g,4℃,10min)取上清?。

        四、實(shí)驗(yàn)步驟?

        標(biāo)準(zhǔn)曲線制備?:將標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋(0.5~20 U/mL)。

        加樣?:每孔加入50μL樣本/標(biāo)準(zhǔn)品,37℃孵育1h?。

        洗滌?:棄液后拍干,PBST洗滌3次(每次30s)?。

        顯色?:加入100μL TMB底物,避光孵育15min。

        終止?:加入50μL終止液,30min內(nèi)測(cè)OD450?。

        五、數(shù)據(jù)分析?

        濃度計(jì)算?:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程(y=ax+b)計(jì)算樣本濃度?。

        靈敏度?:0.19 ng/mL(檢測(cè)限)?。

        六、注意事項(xiàng)?

        避免反復(fù)凍融樣本,分裝后-80℃保存。

        溶血或高脂樣本需離心處理。

        不同批次試劑不可混用。

        注意:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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